Promega Technology——

miRNA/siRNA靶标研究工具

萤光素酶报告基因：

ü 检测蛋白：miRNA与靶标mRNA结合后，mRNA可能不被降解，但蛋白翻译受抑制，用PCR法检测mRNA无变化，但萤光素酶报告基因检测萤光素酶蛋白的产生，更加准确反映miRNA作用机制

ü 细胞无内源性萤光素酶活性：无细胞内源性酶活性干扰

ü 灵敏：最低检测至10^-20 mole or ~6000 个萤光素酶分子

ü 线性范围宽：10⁸ 个数量级

ü 操作简便：5分钟完成细胞裂解、样品制备和检测，同一样品中可检测萤火虫和海肾萤光素酶双报告基因

ü 结果量化：化学发光法检测，发光仪读数直接得到量化结果

双报告基因载体：

单报告基因载体：（需共转染萤火虫萤光素酶载体E1741或E6681做内参）

研究思路 一：（明确miRNA结合位点，研究细胞内源性miRNA活性）

miRNA研究举例 一

miRNA研究举例 二

miRNA研究举例 三

研究思路 二:（高通量筛选有效的siRNA）

miRNA研究文献（更多研究文献可用psiCHECK或pmirGlo为关键词在Highware检索得到）：

1. BRCA1 regulates microRNA biogenesis via the DROSHA microprocessor complex. Shinji Kawai et al, 2012, J. Cell Biol volume 197: 201

2. Sperm-borne microRNA-34c is required for the first cleavage division in mouse. Wei-Min Liu et al., 2012, PNAS, volume 109: 490

siRNA/dsRNA应用文献：

1. Loss of human Greatwall results in G2 arrest and multiple mitotic defects due to deregulation of the cyclin B-Cdc2/PP2A balance. Andrew Burgess, et al., 2010, PNAS, 107, 12564–12569

2. The SoxC protein SEM-2 opposes differentiation factors to promote a proliferative blast cell fate in the postembryonic mesoderm. Chenxi Tian, et al., 2011, Development 138, 1033-1043

shRNA应用文献：

1. RIAM Regulates the Cytoskeletal Distribution and Activation of PLC-1 in T Cells. Nikolaos Patsoukis et al, 2009, Sci. Signal., volume 2: ra79

2. AS160 Modulates Aldosterone-stimulated Epithelial Sodium Channel Forward Trafficking. Xiubin Liang et al, 2010, Mol. Biol. Cell., volume 21: 2024

相关产品：